Наши муки по освоению РЭМА

   Наши муки по освоению РЭМА

   Основой достоверной диагностики оставалась микроскопия мазков костного мозга, вернее, обнаружение лейшманий в препарате. Но методика сложная и требующая высокой квалификации лаборанта, долгих часов сидения за микроскопом. А где было взять время и терпение для этого, ни в одной инструкции не указывалось.

   И потому ученые начали разрабатывать иные методики исследования. В 1977 году я побывал в Москве, на кафедре тропических болезней Центрального Института усовершенствования врачей. Заведовал кафедрой профессор Андрей Яковлевич Лысенко, один из ведущих паразитологов и тропикологов страны. Аспирант или сотрудник кафедры, уже не помню, А. М. Сухоруков приезжал к нам в область по проблеме лейшманиоза. Они помогли мне освоить на их базе методику нового по тем временам анализа: реакции с энзим-мечеными антителами (РЭМА). У них я получил ингредиенты для ее проведения на нашей местной базе.

   В моих дневниках сохранились краткие записи (1979 год) на эту тему: "С лаборантом Антониной Павловной Черниковой поставили РЭМА. Это - первая пробная постановка в практическом медучреждении в Казахстане. Но прошла она неудачно. Позвонил в Москву Сухорукову. Он предложил титровать без антигена, проверить конъюгату (ингредиент, полученный у них). Посчитал, возможно, мы неправильно приготовили фосфатно-солевой буфер (без твина). Потратили полдня впустую. Решили, завтра реакцию повторим".

   "...Вторую неделю мучаемся с постановкой РЭМА. Переделали буфер, добавили твин. Теперь лунки не чернеют, но реакции отрицательные, даже от больных лейшманиозом. Проверил вновь конъюгату - раститровали нормальную сыворотку от 1:100 до 1:12800, выдержали ночь в холодильнике (т.е. применили сыворотку вместо антигена). И опять, думаю, что-то не то сделали, допустили ошибку. Вместо человеческой сыворотки мы взяли кроличью. Хотя, причем это? Опять не прошла реакция".

   "28 декабря вновь, уже в который раз, поставили РЭМА. Сыворотку развел карбонатным буфером и разлил в плашку по 0,1 мл как антиген, поставили стынуть в холодильник на ночь. Утром ставили с конъюгатой и субстратом. Во всех лунках с оттитрованной сывороткой субстрат оказался одного цвета - значит, не работает конъюгата. Звоню опять в Москву, Сухорукову. Он тоже уже смущен нашими неудачами. Обещал прислать новый конъюгат, у них там не ладится с сушкой. Как ни странно, стало легче на душе, винил себя, а виноват ингредиент...".

   Добрые люди уже готовились встречать Новый, 1980-й, год, а мы забуксовали с РЭМА. В чем мы были грешны или конъюгат не выдержал условий пересылки? Так у нас ничего и не получилось. Больше москвичи ничего не присылали, сушка диагностического препарата перед пересылкой оказалась для него губительной.